Druhý díl se zabývá praktickou částí HPLC (praxe v moderní HPLC, vývoj a optimalizace metody, příprava vzorku chromatografické analýze, validace metody v HPLC, kvalifikace HPLC systému, problémy v HPLC) Obsah II. Dílu 1. PRAXE V MODERNÍ HPLC PŘÍPRAVA A POUŽITÍ MOBILNÍ FÁZE PŘÍPRAVA A POUŽITÍ CHROMATOGRAFICKÉ KOLONY 2. VÝVOJ A OPTIMALIZACE METODY ANALÝZA FYZIKÁLNĚ CHEMICKÝCH VLASTNOSTÍ VZORKU A URČENÍ CÍLE METODY VÝBĚR ZPŮSOBU DETEKCE ANALYTŮ VOLBA CHROMATOGRAFICKÉHO SYSTÉMU VOLBA STACIONÁRNÍ A MOBILNÍ FÁZE PŘEDBĚŽNÉ EXPERIMENTY S VYUŽITÍM STANDARDNÍCH LÁTEK DŮKLADNÁ OPTIMALIZACE METODY ŘEŠENÍ PROBLÉMŮ SEPARACE PŘI VÝVOJI METODY SPECIFICKÉ OPTIMALIZAČNÍ PŘÍSTUPY 3. PŘÍPRAVA VZORKŮ K CHROMATOGRAFICKÉ ANALÝZE KONVENČNÍ ZPŮSOBY ÚPRAVY VZORKŮ MODERNÍ TRENDY TECHNIK ÚPRAVY VZORKŮ 4. VALIDACE METOD V HPLC VALIDAČNÍ PARAMETRY PRAKTICKÉ PROVEDENÍ VALIDACE VALIDACE LÉKOPISNÝCH NEBO NORMOVANÝCH METOD TEST ZPŮSOBILOSTI CHROMATOGRAFICKÉHO SYSTÉMU (SYSTEM SUITABILITY TEST) 5. KVALIFIKACE HPLC SYSTÉMU TLAKOVÝ TEST SYSTÉMU TEPLOTA AUTOSAMPLERU (SPRÁVNOST A LINEARITA) TEPLOTA KOLONOVÉHO TERMOSTATU (SPRÁVNOST A LINEARITA) HPLC ČERPADLO HPLC AUTOMATICKÝ DÁVKOVAČ HPLC DETEKTORY 6. PROBLÉMY V HPLC (TROUBLESHOOTING) ZÁKLADNÍ LINIE RETENČNÍ ČAS TVAR A PLOCHA PÍKU CHROMATOGRAM IONTOVĚ VÝMĚNNÁ CHROMATOGRAFIE (IEC) MOLEKULOVÁ VYLUČOVACÍ CHROMATOGRAFIE (SEC) HYDROFILNÍ INTERAKČNÍ CHROMATOGRAFIE (HILIC) VÍCEMODÁLNÍ CHROMATOGRAFIE (MIXED-MODE CHROMATOGRAPHY) IONTOVĚ-PÁROVÁ CHROMATOGRAFIE MICELÁRNÍ CHROMATOGRAFIE A MICELÁRNÍ ELEKTROKINETICKÁ CHROMATOGRAFIE AFINITNÍ CHROMATOGRAFIE HYDROFOBNÍ INTERAKČNÍ CHROMATOGRAFIE (HIC) CHIRÁLNÍ CHROMATOGRAFIE 5. SOUČASNÉ TRENDY V KAPALINOVÉ CHROMATOGRAFII ULTRA-VYSOKOÚČINNÁ KAPALINOVÁ CHROMATOGRAFIE (UHPLC) VYSOKOÚČINNÁ KAPALINOVÁ CHROMATOGRAFIE PŘI ZVÝŠENÉ TEPLOTĚ (HTLC) POVRCHOVĚ PORÉZNÍ ČÁSTICE MONOLITICKÉ KOLONY SUPERKRITICKÁ FLUIDNÍ CHROMATOGRAFIE DVOUDIMENZIONÁLNÍ CHROMATOGRAFIE (2D-LC) MINIATURIZACE V KAPALINOVÉ CHROMATOGRAFII