První díl učebnice je zaměřen na teoretické aspekty (základní pojmy chromatografické separace, instrumentace, stacionární fáze, chromatografické systémy, současné trendy v kapalinové chromatografii) Obsah I. Dílu 1. ZÁKLADNÍ POJMY CHROMATOGRAFICKÉ SEPARACE ZÁKLADNÍ CHROMATOGRAFICKÉ CHARAKTERISTIKY ROZMÝVÁNÍ ELUČNÍ ZÓNY A JEHO PŘÍČINY CHROMATOGRAFICKÁ SEPARACE A JEJÍ OVLIVNĚNÍ GRADIENTOVÁ ELUCE 2. INSTRUMENTACE V HPLC OBECNÉ SCHÉMA KAPALINOVÉHO CHROMATOGRAFU TRANSPORT MOBILNÍ FÁZE DÁVKOVÁNÍ VZORKU KOLONY DETEKČNÍ SYSTÉMY DERIVATIZACE V HPLC 3. STACIONÁRNÍ FÁZE SILIKAGEL CHEMICKY VÁZANÉ FÁZE NA BÁZI SILIKAGELU STACIONÁRNÍ FÁZE NA BÁZI KOVOVÝCH OXIDŮ POLYMERNÍ STACIONÁRNÍ FÁZE HYBRIDNÍ STACIONÁRNÍ FÁZE STACIONÁRNÍ FÁZE NA BÁZI GRAFITOVÉHO UHLÍKU 4. CHROMATOGRAFICKÉ SYSTÉMY SYSTÉMY S NORMÁLNÍMI FÁZEMI (NP-HPLC) SYSTÉMY S REVERZNÍMI FÁZEMI (RP-HPLC) IONTOVĚ VÝMĚNNÁ CHROMATOGRAFIE (IEC) MOLEKULOVÁ VYLUČOVACÍ CHROMATOGRAFIE (SEC) HYDROFILNÍ INTERAKČNÍ CHROMATOGRAFIE (HILIC) VÍCEMODÁLNÍ CHROMATOGRAFIE (MIXED-MODE CHROMATOGRAPHY) IONTOVĚ-PÁROVÁ CHROMATOGRAFIE MICELÁRNÍ CHROMATOGRAFIE A MICELÁRNÍ ELEKTROKINETICKÁ CHROMATOGRAFIE AFINITNÍ CHROMATOGRAFIE HYDROFOBNÍ INTERAKČNÍ CHROMATOGRAFIE (HIC) CHIRÁLNÍ CHROMATOGRAFIE 5. SOUČASNÉ TRENDY V KAPALINOVÉ CHROMATOGRAFII ULTRA-VYSOKOÚČINNÁ KAPALINOVÁ CHROMATOGRAFIE (UHPLC) VYSOKOÚČINNÁ KAPALINOVÁ CHROMATOGRAFIE PŘI ZVÝŠENÉ TEPLOTĚ (HTLC) POVRCHOVĚ PORÉZNÍ ČÁSTICE MONOLITICKÉ KOLONY SUPERKRITICKÁ FLUIDNÍ CHROMATOGRAFIE DVOUDIMENZIONÁLNÍ CHROMATOGRAFIE (2D-LC) MINIATURIZACE V KAPALINOVÉ CHROMATOGRAFII _____________________________________________________________________________________________ Druhý díl se zabývá praktickou částí HPLC (praxe v moderní HPLC, vývoj a optimalizace metody, příprava vzorku chromatografické analýze, validace metody v HPLC, kvalifikace HPLC systému, problémy v HPLC) Obsah II. Dílu 1. PRAXE V MODERNÍ HPLC PŘÍPRAVA A POUŽITÍ MOBILNÍ FÁZE PŘÍPRAVA A POUŽITÍ CHROMATOGRAFICKÉ KOLONY 2. VÝVOJ A OPTIMALIZACE METODY ANALÝZA FYZIKÁLNĚ CHEMICKÝCH VLASTNOSTÍ VZORKU A URČENÍ CÍLE METODY VÝBĚR ZPŮSOBU DETEKCE ANALYTŮ VOLBA CHROMATOGRAFICKÉHO SYSTÉMU VOLBA STACIONÁRNÍ A MOBILNÍ FÁZE PŘEDBĚŽNÉ EXPERIMENTY S VYUŽITÍM STANDARDNÍCH LÁTEK DŮKLADNÁ OPTIMALIZACE METODY ŘEŠENÍ PROBLÉMŮ SEPARACE PŘI VÝVOJI METODY SPECIFICKÉ OPTIMALIZAČNÍ PŘÍSTUPY 3. PŘÍPRAVA VZORKŮ K CHROMATOGRAFICKÉ ANALÝZE KONVENČNÍ ZPŮSOBY ÚPRAVY VZORKŮ MODERNÍ TRENDY TECHNIK ÚPRAVY VZORKŮ 4. VALIDACE METOD V HPLC VALIDAČNÍ PARAMETRY PRAKTICKÉ PROVEDENÍ VALIDACE VALIDACE LÉKOPISNÝCH NEBO NORMOVANÝCH METOD TEST ZPŮSOBILOSTI CHROMATOGRAFICKÉHO SYSTÉMU (SYSTEM SUITABILITY TEST) 5. KVALIFIKACE HPLC SYSTÉMU TLAKOVÝ TEST SYSTÉMU TEPLOTA AUTOSAMPLERU (SPRÁVNOST A LINEARITA) TEPLOTA KOLONOVÉHO TERMOSTATU (SPRÁVNOST A LINEARITA) HPLC ČERPADLO HPLC AUTOMATICKÝ DÁVKOVAČ HPLC DETEKTORY 6. PROBLÉMY V HPLC (TROUBLESHOOTING) ZÁKLADNÍ LINIE RETENČNÍ ČAS TVAR A PLOCHA PÍKU CHROMATOGRAM IONTOVĚ VÝMĚNNÁ CHROMATOGRAFIE (IEC) MOLEKULOVÁ VYLUČOVACÍ CHROMATOGRAFIE (SEC) HYDROFILNÍ INTERAKČNÍ CHROMATOGRAFIE (HILIC) VÍCEMODÁLNÍ CHROMATOGRAFIE (MIXED-MODE CHROMATOGRAPHY) IONTOVĚ-PÁROVÁ CHROMATOGRAFIE MICELÁRNÍ CHROMATOGRAFIE A MICELÁRNÍ ELEKTROKINETICKÁ CHROMATOGRAFIE AFINITNÍ CHROMATOGRAFIE HYDROFOBNÍ INTERAKČNÍ CHROMATOGRAFIE (HIC) CHIRÁLNÍ CHROMATOGRAFIE 5. SOUČASNÉ TRENDY V KAPALINOVÉ CHROMATOGRAFII ULTRA-VYSOKOÚČINNÁ KAPALINOVÁ CHROMATOGRAFIE (UHPLC) VYSOKOÚČINNÁ KAPALINOVÁ CHROMATOGRAFIE PŘI ZVÝŠENÉ TEPLOTĚ (HTLC) POVRCHOVĚ PORÉZNÍ ČÁSTICE MONOLITICKÉ KOLONY SUPERKRITICKÁ FLUIDNÍ CHROMATOGRAFIE DVOUDIMENZIONÁLNÍ CHROMATOGRAFIE (2D-LC) MINIATURIZACE V KAPALINOVÉ CHROMATOGRAFII